天冬氨酸节枝的聚乙烯亚胺作为基因疫苗载体的体外评价

来源： 　作者：　 时间：2015-12-21

    【作者】 马利娜； 金丽丽； 洪美善； 全姬善；
    【Author】 MA Lina;JIN Lili;HONG Meishan;QUAN Jishan;Yanbian University College of Pharmacy;
    【机构】 延边大学药学院；
    【摘要】 [目的]体外评价天冬氨酸节枝的聚乙烯亚胺(AEP-g-PEI)作为非典型性肺炎基因(SARS S DNA)传递载体的可行性.[方法]采用透射电子显微镜及粒径测定仪对由AEP-g-PEI和SARS S DNA形成的复合物(AEP-g-PEI/SARS S DNA)的形态及粒径进行观察和测定;采用MTT法评价AEP-g-PEI的细胞毒性;琼脂糖凝胶电泳法观察SARS S DNA疫苗的压缩及保护能力;采用Western blot法检测AEP-g-PEI与SARS S DNA在细胞内对刺突糖蛋白的表达情况.[结果]AEP-g-PEI和SARS S DNA疫苗形成较为紧密的纳米级球形粒子,可保护SARS S DNA疫苗免受DNA降解酶的降解.在相同质量浓度下,AEP-g-PEI在A549细胞和COS-7细胞中的细胞毒性均低于聚乙烯亚胺(分子质量25ku).Western blot实验结果表明,在MCF7细胞内可检测到SARS S DNA疫苗所编码的刺突糖蛋白.[结论]高分子AEP-g-PEI作为SARS S DNA的传递载体具有可行性。
    【关键词】 基因疫苗； 聚乙烯亚胺； 细胞毒性； 基因表达；
    【基金】 吉林省自然科学基金项目,编号:201115231
    基因疫苗是新型疫苗，即将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的质粒上，然后将质粒导入到人或动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答，以达到预防疾病的目的。基因疫苗可同减毒疫苗引起体液免疫及细胞免疫，它具有安全、不引发其他疾病的优点。基因本身带有负电荷，虽然不易被细胞所吞噬，但可被体内的核酶所降解，因此需要有安全、有效的基因传递载体。高分子基因载体输送系统因具有优异的浓缩ＤＮＡ的能力、低免疫反应、无基因插入片断大小限制、制备方便、易于修饰，使其具有组织及细胞特异性等优点，有望成为体内基因治疗的理想载体。非典型肺炎（SARS）是由ＳＡＲＳ冠状病毒（SARS-COV）引起的极具传染性的呼吸道疾病。

 

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论文摘自《中国医学创新 》，本刊投稿咨询QQ：286947632

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